Kanderová V, Hrušák O, Kalina T. Experimental Hematology 2010 Aug;38(8): 653–660; IF: 3.106
V časopise Experimental Hematology vychází práce autorů z laboratoře CLIP – Cytometrie Kliniky dětské hematologie a onkologie. Hlavní autorka práce Veronika Kanderová shrnuje nejvýznamější poznatky této studie:
Aberantní exprese myeloidních antigenů na buňkách akutní lymfoblastické leukémie je sice dobře zdokumentovaný jev, jeho funkční důsledky pro maligní buňku však stále nebyly objasněny.
V publikovaném článku jsme jako první studovali funkční roli aberantně exprimované, GPI-kotvené molekuly CEACAM6 na buňkách B-prekurzorové akutní lymfoblastické leukémie (BCP-ALL). Naše výsledky jsou překvapivě opačné než výsledky studií o CEACAM6 na jiných typech nádorů, které ukazují anti-apoptotický efekt CEACAM6. Zjistili jsme, že CEACAM6 na BCP-ALL aktivuje signalizační molekuly Erk1/2, Akt a p38 MAPK a ovlivňuje povrchovou expresi a afinitu adhezivních molekul (integrinů). V konečném důsledku však CEACAM6 spouští apoptózu in vitro. Jedním možným vysvětlením je jiné složení lipidových raftů na buňkách BCP-ALL. Lipidové rafty slouží jako membránové signalizační jednotky, které sdružují esenciální proteiny důležité v signalizačních a adhezivních procesech, kterými jsou i GPI-kotvené molekuly (CEACAM6 a CD24). Zajímavé je, že je sledovaný apoptotický efekt CEACAM6 vázaný pouze na leukemické buňky s fúzním proteinem BCR/ABL a při inhibici tohoto fúzního proteinu klinicky používaným léčivem imatinib mesylátem je apoptóza ještě urychlena.
Vaše práce byla velmi specializovaná na zajímavý jev, který se vyskytuje u leukemických buněk. Jaký obecný prospěch pro další práci přinesla práce na tomto problému vaší laboratoři, případně čemu se budete věnovat dál?
Díky práci na tomto tématu se nám povedlo zavést mnoho nových funkčních metod k detekci změn biologického chování buněk ALL v kontextu mikroprostředí kostní dřeně, které s úspěchem používáme my i naši kolegové v dalších projektech. Jedná se o in vitro kultivaci primárních leukemických buněk ve speciálně upraveném séru a na podkladových vrstvách stromálních buněk, o detekci proliferace, apoptózy, viability a buněčného cyklu najednou na živých buňkách a také o inovativní technologie „Ligand-Complex-Based Adhesion Assay“ k detekci změn afinity a avidity povrchových molekul a „Single-Cell Phospho-Flow Cytometry“ k detekci fosforylovaných forem intracelulárních signalizačních proteinů, které umožňuje identifikovat stimul-specifický signalizační profil v definované buněčné subpopulaci, a následně např. molekulární odpověď na terapii. V současné době sledujeme změny signalizačního profilu pomocí „Cytometry Bead Assay“, která nám umožňuje detekci a kvantifikaci stovek až tisíců různých proteinů z jednoho omezeného vzorku biologického materiálu.
