An adsorptive transfer technique coupled with Brdicka reaction to reveal the importance of metallothionein in chemotherapy with platinum based cytostatics.

Představujeme vám další článek o metalothioneinech u nádorových onemocnění, jenž je výsledkem spolupráce pracovníků z KDHO, Oční kliniky a Ústavu lékařské chemie a biochemie s brněnskými kolegy z Mendelovy zemědělské a lesnické univerzity.
 
Metalothioneiny (MT) jsou nízkomolekulární látky, které na úrovni buňky hrají důležitou roli v metabolismu kovů. Autoři této publikace pracovali s myšlenkou, že by zvýšená hladina MT v nádorových buňkách mohla být spojena s rezistencí k cytostatikům. Voltametricky vyšetřovali obsah MT in vitro v buňkách neuroblastomových linií senzitivních a rezistentních k cisplatině, stejným způsobem in vivo po léčbě karboplatinou: jednak v nádorových buňkách králíků, jednak od pacientů léčených s retinoblastomem.
 
MVDr. Jana Hrabětu, Ph.D., z Kliniky dětské hematologie a onkologie jsme se zeptali:
 
Jaký je princip použité metody?
V práci jsme využili elektrochemické metody, tzv. adsorptivní přenosové techniky (AdTS) s diferenční pulzní voltametrií (DPV). Adsorptivní přenosová technika byla vyvinuta jako vhodný nástroj pro elektrochemickou analýzu biomolekul, tedy zejména proteinů, DNA a jejich interakcí. Vlastní princip elektrochemických metod spočívá v tom, že je měřená molekula schopna přijímat elektrony od pracovní elektrody (redukce) nebo jí elektrony odevzdávat (oxidace), případně se na elektrodu specificky adsorbovat a pod vlivem elektrického potenciálu desorbovat. Měří se závislost proudu protékajícího pracovní elektrodou na potenciálu měnícím se s časem. Výsledkem analýzy je signál, který je zobrazen v podobě tzv. voltamogramů a který je úměrný koncentraci sledované látky (metalothioneinů). Citlivost metody umožňuje sledovat interakce látek v nanomolárních koncentracích.
 
Hraje buněčný obsah metalothioneinů roli v rezistenci k platinovým cytostatikům?
Je známo, že intracelulární thioly se podílí na chemorezistenci na platinová cytostatika, přesto role metalothineinů (MT) v chemoreristenci k těmto látkám není dosud zcela jasná. Z našich experimentů je zřejmé, že buněčná linie neuroblastomu s in vitro navozenou chemorezistencí k cisplatině v porovnání s linií mateřskou reaguje na cisplatinu a nebo karboplatinu masivní indukcí exprese MT. Je zajímavé, že rozdíl je právě v inducibilitě exprese MT, tzn. bazální hladiny MT jsou u linie senzitivní i rezistentní podobné. V experimentech jsme tedy prokázali pouze nepřímý vliv MT na chemorezistenci k platinovým cytostatikům.
 
-az-