Isolation of rat lung mast cells for purposes of one-week cultivation using novel Percoll variant Percoll PLUS.

Kubrycht J, Maxová H, Nyč O, Vajner L, Novotná J, Hezinová A, Trnková A, Vrablová K, Vytášek R, Valoušková V. Physiol Res. 2010 Jun 9. IF: 1.653

Na preklinických ústavech se zabývají experimentálním výzkumem funkce žírných buněk v plicní tkáni za normoxických a hypoxických podmínek. V uvedené publikaci z jejich díla je popsána izolace plicních žírných buněk pomocí Ficoll-Paque PLUS a Percoll PLUS a jejich následná kultivace v přítomnosti faktoru kmenových buněk, IL3, IL6 a kombinace antibiotik. Zajímavých výsledků bylo dosaženo, když byly společně kultivovány buňky dvou alogenních frakcí – došlo k překvapivým změnám v jejich morfologii a velikosti. Naopak kultivace buněk za hypoxických podmínek nepřinesla výrazné morfologické změny, i když důležité strukturní změny na úrovni elektron-mikroskopické (jak ukazují výsledky blottingu) vyloučit nelze.
 
Prvním autorem je RNDr. Jaroslav Kubrycht, CSc., z Centra výzkumu chorob srdce a cév. Zeptali jsme se ho, jak si vysvětluje, že se ko-kultivované buňky morfologicky mění.
Odpověď na tuto otázku lze rozdělit zhruba do tří pohledů:

  1. Na morfologii mají vliv cytokiny vznikající při směsné leukocytární reakci, pravděpodobně především IL18, jehož receptor je superiorně exprimován na povrchu žírných buněk (podrobněji viz diskuse v článku). IL18 se kromě aloreakcí objevuje také například při odpovědi na lipopolysacharid. Klidově je syntetizován především bronchiálními epiteliálními buňkami a kardiomyocyty.
  2. Změny morfologie jsou pravděpodobně přímým důsledkem změněné adherence a readherence k firemně modifikovanému skleněnému povrchu Labteků během kultivace in vitro (asi ještě částečně dále modifikovanému kultivovanými buňkami a mediovým sérem). Tyto děje mohou být ovlivněny nejen zmíněnými cytokiny, ale také chemokiny (hlavně v případě readherence) a různými typy interakcí mezi žírnými a minoritními residuálními buňkami.
  3. Důležitou podmínkou pozorovaných změn je fenotypová proměnlivostí izolovaných žírných buněk. Většina buněk jsou nedozralé žírné buňky vývojově nepříliš vzdálené od kmenových buněk z kostní dřeně. Pravděpodobně nededifrencují, ale jejich fenotypický repertoár je přece jen širší než u zralých žírných buněk.
     


 
Obr. Morfologie kultivovaných žírných buněk (převzato z výše uvedeného článku, Kubrycht a kol. 2010)

 
-az-

Vytvořeno: 7. 12. 2010 / Upraveno: 8. 1. 2019 / prof. MUDr. Radek Špíšek, Ph.D.