Křížková S, Adam V, Eckschlager T, Kizek R. Electrophoresis. 2009 Nov;30(21):3726–35. IF: 3.609
Uvedená práce se zabývá optimalizací detekce metalothioneinů, jež jsou zde představeny jako proteiny ovlivňující metabolismus iontů těžkých kovů, se vztahem ke vzniku a progresi nádorových onemocnění. Princip jejich detekce je následující: vzorky jsou naneseny na blotovací membránu, fixovány, inkubovány s primárními protilátkami, poté se značenými sekundárními protilátkami a imunoenzymaticky vizualizovány. V článku detailně popsaným postupem bylo dosaženo detekčního limitu 3pg metalothioneinů v 1 μl. Optimalizovaný postup byl následně použit k detekci metalothioneinů ve fibroblastových buněčných liniích a v séru dětských pacientů s medulloblastomem. Výsledky byly ověřeny elektrochemickým měřením metodou diferenciální pulzní voltametrie.
Máte konkrétní plány využití uvedeného postupu? Jaké? Zeptali jsme se prof. MUDr. Tomáše Eckschlagera, CSc., z Kliniky dětské hematologie a onkologie.
Na problematice metalothioneinů spolupracujeme již několik let s Ústavem chemie a biochemie Mendlovy zemědělské a lesnické university v Brně. Prokázali jsme jejich vztah k rezistenci vůči platinovým derivátům a literární údaje i naše předběžné výsledky naznačují, že by metalothioneiny mohly být do budoucna využitelné u některých nádorů jako prognostický faktor nebo nádorový marker. To si ovšem vyžádá rozsáhlé studie. Jednou z nezbytných podmínek zahájení těchto studií je i vhodná metodika. Vzhledem k tomu, že je většinou doporučováno použít dvě nezávislé metody, snažili jsme se zavést metodu imunologickou, která je sice poněkud méně citlivá, ale je v současnosti považována za „zlatý standard“ v detekci proteinů. Výhodou imunologické metody může být i menší riziko interferencí s ionty kovů.
-az-
