Procházka P, Hraběta J, Vícha A, Eckschlager T. Cancer Genet Cytogenet. 2010 Jan 1;196(1):96–104. IF: 1.482
V článku Mgr. Pavla Procházky je publikována práce skupiny prof. Eckschlagera z Kliniky dětské hematologie a onkologie věnovaná experimentálnímu výzkumu účinků chemoterapie na amplifikovaný gen MYCN v neuroblastomových buňkách. Buňky různých neuroblastomových linií a od nich odvozených linií rezistentních k některým cytostatikům byly vystaveny účinkům hydroxyurey a dalším cytostatikům užívaným k léčbě neuroblastomu (cisplatině, doxorubicinu a vincristinu). Pomocí cytogenetických metod (CGH a FISH) byl sledován počet kopií amplifikovaného genu MYCN v průběhu pasážování buněk. Ukázalo se, že účinkem chemoterapeutik postupně klesá počet kopií genu MYCN v senzitivních buňkách a blíží se počtu kopií v buňkách rezistentních k cytostatikům. Tento účinek byl v literatuře v případě amplifikovaného MYCN detekovaného jako double minutes popsán již dříve. Autoři uvedené publikace ho prokázali též u buněk s amplifikovaným MYCN detekovaným jako homogenně se barvící chromozomální oblasti.
Následující otázky jsme položili Mgr. Pavlu Procházkovi:
Amplifikovaný gen MYCN bývá v některých případech detekován jako „double minutes“. Co to znamená?
V průběhu vzniku nádoru může docházet k mnohonásobné duplikaci genů, které nádorové buňce pomáhají v rychlejším dělení a mohou též způsobit odolnost buňky vůči účinkům cytostatik. Mechanismus vzniku amplifikace MYCN v neuroblastomu je stále neznámý, ale zdá se, že nejlépe odpovídá tzv. „replication – excision“ modelu. DNA je opakovaně replikovaná pouze v jedné chromozomální oblasti, nadbytečná DNA je následně vystřižena a přetrvává ve formě malých párových acentrických extrachromosomálních chromatinových tělísek, tzv. „double minutes“ (double-minute chromatin bodies). Tato extrachromosomální DNA může být integrována do jiného chromosomu a může být dále amplifikována. „Double minutes“ představují nejčastější uspořádání amplifikovaného genu MYCN v buňkách neuroblastomu. Na druhou stranu v buněčných liniích odvozených od neuroblastomu je amplifikace MYCN ve formě „double minutes“ méně častá.
Jaký je mechanismus, kterým dochází ke ztrátám genu MYCN?
Ztráty nadbytečných amplifikovaných kopií genu MYCN ve formě „double minutes“ byly pozorovány jak v buňkách získaných od pacientů, tak v buňkách z linií. Nejpravděpodobnějším mechanismem ztrát kopií je formování tzv. mikrojader obsahujících nadbytečné kopie MYCN. Tato „mikrojádra“ jsou vypuzena do cytoplasmy, kde dochází k jejich degradaci. K vypuzování mikrojader může docházet pomalu a samovolně, nebo může být zrychleno působením cytostatik, zejména aplikací hydroxyurey. Bylo zjištěno, že úbytek amplifikovaných kopií snižuje tumorigenicitu.
-az-
